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抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進(jìn)行初步應(yīng)用。方法采用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經(jīng)50%硫酸銨粗提后,再經(jīng)陰離子交換樹脂DE52進(jìn)一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單克隆抗體共價(jià)偶聯(lián)于磁性微球表面,制備抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠。用制備的免疫磁珠檢測(cè)乙肝表面抗原,并與市售ELISA試劑盒的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果共獲得5株雜交瘤細(xì)胞株,其中1F12細(xì)胞株分泌的抗體效價(jià)、相對(duì)親和力較高,特異性較好;純化的1F12株單抗的純度達(dá)95%,蛋白含量為2.4mg/ml,ELISA效價(jià)為106,相對(duì)親和力為0.2mg/L,與FITC標(biāo)記的BSA可特異性結(jié)合;納米磁性粒子的平均粒徑為150nm,鐵含量為71.63%;羧基磁性微球的平均粒徑為210nm,羧基含量約為2.15mmol/g;每克羧基磁性微球可結(jié)合抗熒光素單克隆抗體約12mg,制備的免疫磁珠可有效結(jié)合熒光素標(biāo)記的蛋白。應(yīng)用抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠檢測(cè)乙型肝炎表面抗原的靈敏度高于ELISA試劑,檢測(cè)限達(dá)0.1ng/ml。結(jié)論成功制備了抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,其具有應(yīng)用于免疫檢測(cè)分析的價(jià)值。免疫磁珠法分離膽囊CancerCD133陽性細(xì)胞及其生物學(xué)特性鑒定。湖南anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠市場(chǎng)報(bào)價(jià)
免疫共沉淀(COIP)優(yōu)點(diǎn)
(1)相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài);
(2)蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的,可以避免人為的影響;
(3)可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。
免疫共沉淀(COIP)缺點(diǎn)
(1)可能檢測(cè)不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用;
(2)兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合,而可能有第三者在中間起橋梁作用;
(3)必須在實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)目的蛋白是什么,以選擇***檢測(cè)的抗體,所以,若預(yù)測(cè)不正確,實(shí)驗(yàn)就得不到結(jié)果,方法本身具有冒險(xiǎn)性。
(4)靈敏度沒有親和色譜高。 天津anti-Flag COIP免疫磁珠哪家好免疫磁珠法分離純化人腎CancerCD133~+細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究。
免疫磁珠法分離細(xì)胞是基于細(xì)胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結(jié)合,在外加磁場(chǎng)中,通過抗體與磁珠相連的細(xì)胞被吸附而滯留在磁場(chǎng)中,無該種表面抗原的細(xì)胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結(jié)合而沒有磁性,不在磁場(chǎng)中停留,從而使細(xì)胞得以分離。免疫磁珠應(yīng)用分為正選法和負(fù)選法:正選法-磁珠結(jié)合的細(xì)胞就是所要分離獲得的細(xì)胞負(fù)選法-磁珠結(jié)合不需要的細(xì)胞,游離于上清液的細(xì)胞為所需細(xì)胞,一般而言,負(fù)選法比正選法的磁珠用量大磁珠:大小在0.1-0.45mm包被了生產(chǎn)的高質(zhì)量單抗磁珠已為白細(xì)胞亞群的分選所優(yōu)化將包被了特異性單抗的BDIMag磁珠加入細(xì)胞懸液,磁珠特異性地與有相應(yīng)抗原的細(xì)胞亞群結(jié)合,通過分離得到的連有磁珠的細(xì)胞可直接用于功能試驗(yàn)和用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。
磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,制備抗單增李斯特菌免疫磁珠;將免疫磁珠與顯色培養(yǎng)法結(jié)合,初步建立起利用免疫磁珠分離技術(shù)對(duì)單增李斯特菌進(jìn)行分離鑒定的檢測(cè)方法.從而為食品中單增李斯特菌的檢測(cè)提供一種快速,高效和靈敏的檢測(cè)新方法.方法:以單增李斯特菌體作為免疫抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔抗單增李斯特菌多克隆抗體,鑒定多抗活性以及與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;用激光粒度儀和透射電鏡分析不同活性基團(tuán)修飾磁珠的粒徑大小和分散性,選擇性質(zhì)穩(wěn)定的磁珠用以制備免疫磁珠;設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),摸索pH,溫度,時(shí)間對(duì)氨基修飾磁珠與多抗偶聯(lián)的影響,選擇比較好條件制備免疫磁珠并用于捕獲單增李斯特菌;設(shè)計(jì)不同的偶聯(lián)緩沖溶液,偶聯(lián)時(shí)間,偶聯(lián)溫度,通過比較羧基修飾磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯(lián)條件,運(yùn)用制備的免疫磁珠對(duì)樣品中的單增李斯特菌進(jìn)行捕獲,并與顯色平板結(jié)合試驗(yàn),鑒定制備的免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。甘肅anti-HA COIP免疫磁珠代理價(jià)格4折起
免疫磁珠負(fù)性富集結(jié)合免疫熒光抗體技術(shù)檢測(cè)卵巢Cancer患者外周血CTCs的方法建立和應(yīng)用。湖南anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠市場(chǎng)報(bào)價(jià)
免疫磁珠分離羊水來源OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞的可行性.方法 采用免疫磁珠細(xì)胞分選法去除羊水細(xì)胞中CD44和SSEA4陽性細(xì)胞,使OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞間接得到分離,體外培養(yǎng)擴(kuò)增后,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)特性,免疫熒光染色計(jì)算OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞得率,Real-TimePCR比較分離前后OCT-4表達(dá)量的差異,免疫組化檢測(cè)NANOG,AKP,MAP-2,NGFR和Myosin等細(xì)胞因子的表達(dá).結(jié)果 經(jīng)免疫磁珠分離的細(xì)胞接種12h內(nèi)貼壁生長(zhǎng),形態(tài)呈梭形,部分呈多角形,融合后形成輻射狀排列.免疫熒光染色OCT-4陽性細(xì)胞得率為(90.15±8.25)%,Real-TimePCR檢測(cè)結(jié)果顯示分離后細(xì)胞OCT-4的表達(dá)量較未分離細(xì)胞和MSC有***性差異(P<0.01).原代培養(yǎng)可獲得(1~2)×107個(gè)細(xì)胞,3代可獲得(2~4)×108個(gè)細(xì)胞,傳至10代以后細(xì)胞的增殖能力下降.免疫組化結(jié)果顯示OCT-4陽性胎兒干細(xì)胞表達(dá)NANOG,AKP,MAP-2和NGFR等細(xì)胞因子.結(jié)論 免疫磁珠細(xì)胞分選法可以從羊水中分離出OCT-4陽性的胎兒干細(xì)胞,分離后的細(xì)胞保持干細(xì)胞原有特性及生物學(xué)特征,可作為組織工程種子細(xì)胞.湖南anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠市場(chǎng)報(bào)價(jià)
上海普平生物科技有限公司總部位于高逸路112-118號(hào)3幢5286室,是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓;實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品的銷售;計(jì)算機(jī)軟件開發(fā);計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)工程;從事貨物及技術(shù)進(jìn)出口業(yè)務(wù)。 的公司。普平生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細(xì)胞、分子、蛋白實(shí)驗(yàn),科研項(xiàng)目。普平生物致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對(duì)用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗(yàn)。普平生物始終關(guān)注自身,在風(fēng)云變化的時(shí)代,對(duì)自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使普平生物在行業(yè)的從容而自信。