實驗優(yōu)化建立基于免疫磁分離技術(shù)對金黃色葡萄球菌的快速分離方法,為后續(xù)快速檢測提供基礎(chǔ).利用金黃色葡萄球菌多抗制備的免疫磁珠對其捕獲.結(jié)合平板菌落計數(shù),考察包被磁珠時多抗加入量,免疫磁珠加入量及捕獲時間等因素對捕獲效率的影響.在單因素實驗基礎(chǔ)上進(jìn)行正交實驗,并對該方法的靈敏度,特異性及其在食品中的應(yīng)用效果初步探索.結(jié)果表明,比較好捕獲條件為抗體加入量30μL,免疫磁珠加入量80μL,捕獲時間45min,在此條件下捕獲效率均超過30%,該方法捕獲限可達(dá)到101CFU/mL,特異性良好,并初步用于羊肉卷洗水中金黃色葡萄球菌的快速分離,捕獲時間小于1h.免疫磁分離作為一種快速的分離篩選方法,可用于食源性金黃色葡萄球菌的快速分離.BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。陜西protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學(xué)合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯(lián)的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結(jié)果:合成的MAP具有較強(qiáng)的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達(dá)1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達(dá)79%.應(yīng)用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經(jīng)鑒定與其他抗原表位無反應(yīng)性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結(jié)論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對某一抗原表位的特異性抗體,其性質(zhì)類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應(yīng)用前景.
BEENbio鏈霉親和素磁珠本產(chǎn)品是由磁性納米顆粒與高純度的鏈霉親和素共價偶聯(lián)而成。這種微球能用于捕獲生物素標(biāo)記的底物，如抗原、抗體和核酸等。鏈霉親和素(streptavidin)與生物素(biotin)的結(jié)合是***的非共價生物交互作用之一，因此，這也是親和層析法所使用的一種強(qiáng)大工具。生物分子可以與生物素輕松融合，而層析基質(zhì)上固定的鏈霉親和素配體可以與之結(jié)合，而且這種鏈霉親和素-生物素相互作用具有較低的非特異親和性，捕獲所需的底物能夠直接應(yīng)用于后續(xù)實驗。本產(chǎn)品可廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)檢測、核酸純化、核酸固相雜交檢測、細(xì)胞分選等分子生物學(xué)實驗。BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在一定條件下可分化成為多種結(jié)締組織細(xì)胞,也可分化成神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞.目的:觀察采用免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經(jīng)干細(xì)胞的生物學(xué)特征.設(shè)計,時間及地點:以患者自身骨髓組織為觀察對象的實驗,于2003-03/2007-06在菏澤市立醫(yī)院檢驗科完成.材料:骨髓組織來自菏澤市立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的中風(fēng),老年性癡呆,帕金森病,腦缺血等神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者.方法:利用免疫磁珠表面的特異性抗體與骨髓組織中神經(jīng)干細(xì)胞抗原相結(jié)合,在磁場作用下使結(jié)合磁珠與其他細(xì)胞分離,從而獲得神經(jīng)干細(xì)胞,再將所分離的純化神經(jīng)干細(xì)胞接種到含體積分?jǐn)?shù)為0.20胎牛血清的EaglesMEM培養(yǎng)液,再在培養(yǎng)基中加入堿性成纖維因子和表皮生長因子進(jìn)行原代培養(yǎng).主要觀察指標(biāo):采用免疫組織化學(xué)染色與免疫熒光染色鑒定細(xì)胞,并采用流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞DNA含量.結(jié)果:在相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)豐滿,胞核及核仁清晰可見,神經(jīng)突起粗大,網(wǎng)絡(luò)稠密.免疫組織化學(xué)和免疫熒光染色顯示,細(xì)胞神經(jīng)元特異性烯醇化酶,神經(jīng)蛋白,膠質(zhì)纖維酸性蛋白酶,微管相關(guān)蛋白為陽性.傳代后的細(xì)胞用流式細(xì)胞術(shù)測定DNA含量為正常二倍體,無誘發(fā)突變.應(yīng)用免疫磁珠分離成人骨髓中STRO-1陽性細(xì)胞。安徽protein A/G COIP免疫磁珠批量定制
多聚抗原肽免疫磁珠在制備單表位抗體中的應(yīng)用。陜西protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
COIP常見問題及對策
1：如何提高抗體與磁珠結(jié)合效率?
磁珠與抗體的結(jié)合效率與抗體的種屬來源及所屬亞型有關(guān)，請確 認(rèn)抗體的類型與 Protein A/G 配基的親和效率。如抗體所屬亞型與 Protein A/G的親和度較低，可以通過增加抗體與磁珠的孵育時間（ 30～120min）、提高結(jié)合緩沖液的pH值（8～9）及降低離子強(qiáng)度（ 25～100mM NaCl）等方法提高親和效率。
2：如何提高磁珠在免疫沉淀反應(yīng)中的特異性?
可以先將抗體與樣品進(jìn)行孵育，形成抗體-抗原復(fù)合物，再用 Protein A/G磁珠捕獲復(fù)合物。這種方法可以提高抗體與抗原的結(jié)合效 率，并降低磁珠與樣品接觸的時間，從而提高沉淀產(chǎn)物的特異性。對 于蛋白質(zhì)/核酸共沉淀或染色質(zhì)免疫共沉淀也推薦使用此法。 陜西protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
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