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甘肅anti-Flag COIP免疫磁珠經(jīng)銷商價(jià)格4折起

來源： 發(fā)布時(shí)間：2022-01-26

核酸提取磁珠通過對磁珠進(jìn)行一定的包被（如硅基、氨基、羧基等），從而可以實(shí)現(xiàn)對核酸的高通量、自動(dòng)化提取，這一技術(shù)產(chǎn)生于20世紀(jì)80年代，已經(jīng)有了成熟的試劑盒并形成為產(chǎn)業(yè)。隨著基因檢測、個(gè)性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及，在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動(dòng)化的***，傳統(tǒng)DNA提取方法的局限愈來愈明顯，而磁珠法DNA提取的優(yōu)勢則愈來愈明顯：①能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、大批量操作，已有96孔的核酸自動(dòng)提取儀，用一個(gè)樣品的提取時(shí)間即可實(shí)現(xiàn)對96個(gè)樣品的處理，符合生物學(xué)高通量的操作要求，使得傳染性疾病爆發(fā)時(shí)能夠進(jìn)行快速及時(shí)的應(yīng)對，這一特點(diǎn)使得傳統(tǒng)方法望塵莫及；②操作簡單、用時(shí)短，整個(gè)提取流程只有四步，大多可以在36-40分鐘內(nèi)完成；③安全無毒，不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯仿等有毒試劑，對實(shí)驗(yàn)操作人員的傷害減少到**少，完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念；④磁珠與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。用免疫磁珠法檢測抗白念珠*烯醇化酶抗體。甘肅anti-Flag COIP免疫磁珠經(jīng)銷商價(jià)格4折起

實(shí)驗(yàn)優(yōu)化建立基于免疫磁分離技術(shù)對金黃色葡萄球菌的快速分離方法,為后續(xù)快速檢測提供基礎(chǔ).利用金黃色葡萄球菌多抗制備的免疫磁珠對其捕獲.結(jié)合平板菌落計(jì)數(shù),考察包被磁珠時(shí)多抗加入量,免疫磁珠加入量及捕獲時(shí)間等因素對捕獲效率的影響.在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),并對該方法的靈敏度,特異性及其在食品中的應(yīng)用效果初步探索.結(jié)果表明,比較好捕獲條件為抗體加入量30μL,免疫磁珠加入量80μL,捕獲時(shí)間45min,在此條件下捕獲效率均超過30%,該方法捕獲限可達(dá)到101CFU/mL,特異性良好,并初步用于羊肉卷洗水中金黃色葡萄球菌的快速分離,捕獲時(shí)間小于1h.免疫磁分離作為一種快速的分離篩選方法,可用于食源性金黃色葡萄球菌的快速分離.廣東anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制多聚抗原肽免疫磁珠在制備單表位抗體中的應(yīng)用。

免疫共沉淀（COIP）實(shí)驗(yàn)過程
（1）轉(zhuǎn)染后24-48 h 可收獲細(xì)胞，加入適量細(xì)胞裂解緩沖液（含蛋白酶抑制劑），冰上裂解30min, 細(xì)胞裂解液于4°C， 最大轉(zhuǎn)速離心30 min后取上清；
（2）取少量裂解液以備Western blot分析，剩余裂解液加1μg相應(yīng)的抗體加入到細(xì)胞裂解液，4°C緩慢搖晃孵育過夜；
（3）取10μl protein A 瓊脂糖珠，用適量裂解緩沖液洗3 次，每次3,000 rpm離心3 min；
（4）將預(yù)處理過的10μl protein A 瓊脂糖珠加入到和抗體孵育過夜的細(xì)胞裂解液中4°C緩慢搖晃孵育2-4h，使抗體與protein A瓊脂糖珠耦聯(lián)；
（5）免疫沉淀反應(yīng)后，在4°C 以3,000 rpm 速度離心3 min，將瓊脂糖珠離心至管底；將上清小心吸去，瓊脂糖珠用1ml裂解緩沖液洗3－4次；***加入15μl的2×SDS 上樣緩沖液，沸水煮5分鐘；
（6）SDS-PAGE, Western blotting或質(zhì)譜儀分析。
注意的問題：
（1）細(xì)胞裂解采用溫和的裂解條件，不能破壞細(xì)胞內(nèi)存在的所有蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用，多采用非離子變性劑（NP40或Triton X-100)。每種細(xì)胞的裂解條件是不一樣的，通過經(jīng)驗(yàn)確定。不能用高濃度的變性劑（0.2%SDS)，細(xì)胞裂解液中要加各種酶抑制劑，如商品化的cocktailer。
（2）使用明確的抗體，可以將幾種抗體共同使用。
（3）使用對照抗體：

Anti Flag COIP磁珠

產(chǎn)品價(jià)格


產(chǎn)品貨號(hào)
規(guī)格
價(jià)格
Beenbio -PR002-0.4
0.4 mL
1150 RMB
Beenbio -PR002-1
1 mL
1780 RMB
Beenbio -PR002-5
5 mL
6825 RMB


產(chǎn)品描述

BEENbio Anti Flag COIP磁珠在大小為1um的納米磁珠上供價(jià)結(jié)合了大量的小鼠Anti Flag單克隆抗體，與傳統(tǒng)的Anti Flag COIP瓊脂糖凝膠比較，抗體結(jié)合能力相同，背景更低，由于采用磁性分離，使得每次COIP可以節(jié)省40%的時(shí)間。


產(chǎn)品特性


項(xiàng)目
特性
抗體亞型
鼠源IgG1
抗體純化方法
Protein A 純化制備
適用范圍
免疫共沉淀（IP），Flag tag蛋白純化
推薦使用體積
COIP: 500μl 細(xì)胞裂解液 使用 10μL磁珠
融合蛋白結(jié)合容量
大于1.1 mg Flag tagged protein/mL 磁珠



儲(chǔ)存條件

4oC長期穩(wěn)定，


使用說明

磁珠的準(zhǔn)備

重懸Anti Flag 免疫磁珠，取10 μL加入到500 μL TBS，洗滌3次，分離磁珠，棄上清。

樣品的結(jié)合（binding）

在上述沉淀中加入500 μL細(xì)胞裂解液，室溫緩慢孵育2小時(shí)或者4°C條件下過夜，分離磁珠，棄上清。

結(jié)合過程中，磁珠可能會(huì)出現(xiàn)聚團(tuán)或呈片狀，屬于正?，F(xiàn)象，不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

洗滌（washing）：0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次，每次5min，分離磁珠，棄上清。

洗脫（elution）:上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液，煮沸5 min，冷卻后分離磁珠，吸取上清液，進(jìn)行SDS-PAGE檢測。 BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。

免疫磁珠分離法分選弓形蟲速殖子,以去除宿主細(xì)胞成分,并 盡可能對蟲體的生物學(xué)特性無不良影響,為弓形蟲的基礎(chǔ)與臨床研究提供技術(shù)基礎(chǔ).方法采用弓形蟲Wh3株( China 1基因型)速殖子***小鼠,提取腹腔液,常規(guī)方法制備速殖子可溶性抗原,免疫家兔,獲得兔抗弓形蟲多克隆IgG抗體.用抗體包被的免疫磁珠對小鼠腹腔液內(nèi) 弓形蟲速殖子進(jìn)行純化,比較其純度,回收率,蟲體活力,毒力與***性.結(jié)果用免疫磁珠分離技術(shù)純化弓形蟲速殖子后,其純度提高到98.2%,細(xì)胞***率為 96%,蟲體回收率為73.5%;用內(nèi)鹽法( MTS )細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒檢測分離后的速殖子活性為95.6%.定量分組***小鼠后死亡時(shí)間無***性差異.結(jié)論免疫磁珠分離的速殖子純度,細(xì)胞***率和 蟲體回收率較高,能有效去除宿主細(xì)胞,且對速殖子的活性和毒力無影響.該法操作簡便快速,無需昂貴的儀器設(shè)備,具有較大的實(shí)用價(jià)值.應(yīng)用免疫磁珠分離成人骨髓中STRO-1陽性細(xì)胞。北京protein A/G COIP免疫磁珠批量定制

免疫磁珠法富集循環(huán)腫瘤細(xì)胞研究進(jìn)展。甘肅anti-Flag COIP免疫磁珠經(jīng)銷商價(jià)格4折起

CoIP ：實(shí)驗(yàn)原理
一切從 CoIP 的原理談起：免疫共沉淀是一種以抗體和抗原識(shí)別專一性為基礎(chǔ)，用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。
實(shí)驗(yàn)步驟
第一步：樣品制備
首先進(jìn)行樣品制備，以提取出想要研究的蛋白，由于不同類型的細(xì)胞裂解條件有所差異，這里不展開介紹。
注意事項(xiàng)：
細(xì)胞裂解要采用溫和的裂解條件，避免破壞細(xì)胞內(nèi)存在的蛋白間相互作用，裂解、洗滌時(shí)需使用非變性裂解液，如 NP-40 和 Triton X-100。
此外，由于不同細(xì)胞裂解條件不一樣，建議通過預(yù)實(shí)驗(yàn)來確定比較好條件。
第二步：固定抗體
在共沉淀之前，先將固相基質(zhì)與抗體共同孵育，從而使兩者結(jié)合，常用的固相基質(zhì)有瓊脂糖 Agarose 和磁珠 Magnetic beads。
瓊脂糖 Agarose 具有簡單易用，直徑大，結(jié)合力強(qiáng)，多孔易吸附的特點(diǎn)；磁珠具有直徑小，背景低，抗體消耗少的特點(diǎn)，但操作時(shí)需借助磁力架。
注意事項(xiàng)：
抗體的選擇十分重要，選經(jīng)過 IP 驗(yàn)證的抗體，可以減少假陽性概率。
同時(shí)，要注意抗體/緩沖液的比例，抗體稀釋過度不利于后續(xù)抗原抗體結(jié)合；而抗體過多就不能完全沉降在固相基質(zhì)上，殘存于上清。
操作時(shí)，為了避免損傷 beads，使用大口徑或截短***頭進(jìn)行加樣。
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標(biāo)簽： 免疫磁珠