外泌體的形成始于細胞內(nèi)陷，成熟于多囊泡胞內(nèi)體，終于膜融合。細胞通過內(nèi)吞作用產(chǎn)生小囊泡，小囊泡融合形成早期胞內(nèi)體（earlyendosome），在多個蛋白的協(xié)同調(diào)控下，早期胞內(nèi)體出芽形成含有多個腔內(nèi)小囊泡的多泡體（multivesicularbodies，MVB），這個過程中這些腔內(nèi)小囊泡（intraluminalvesicles，ILVs）會裝載各種核酸和蛋白質(zhì)等分子，泡內(nèi)體較后在GTPase家族中RAB酶的調(diào)節(jié)下與細胞膜融合。隨后，這些小囊泡會被釋放到細胞外，稱為外泌體。外泌體是通過細胞內(nèi)吞細胞膜融合主動排除的物質(zhì)，大小均勻，而微泡是由細胞直接出芽脫落生成，大小不均一。隨著EV研究倍受世界矚目，各國啟動了大型研究項目。唾液提取試劑盒分類

外泌體的miRNA或蛋白質(zhì)等遺傳分子與肝臟病理息息相關(guān)，在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點或分子標志物。對外泌體的研究，將有利于闡述肝臟及其疾病的發(fā)生和發(fā)展機制，為尋求臨床可用的biomarkers和開發(fā)新的治理方法提供支持。外泌體可以通過轉(zhuǎn)運蛋白和miRNAs進行細胞間交流，從而作用于周圍的細胞并改變肝臟的微環(huán)境。細胞內(nèi)多泡體（MVBs）與細胞膜融合，釋放內(nèi)部的外泌體到細胞外，被其他細胞攝取，通過細胞膜融合或內(nèi)吞作用釋放攜帶的內(nèi)含物，在受體細胞中調(diào)控生理活動。外泌體介導(dǎo)的細胞間交流可以改變瘤的生長、細胞遷移、抗病毒等生理過程。血細胞提取試劑盒臨床前研究的證據(jù)表明干細胞釋放的外泌體可作為心肌修復(fù)的潛在無細胞治理劑。

在免疫系統(tǒng)中，淋巴細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞、肥大細胞等均可以產(chǎn)生外泌體。研究表明免疫細胞來源的外泌體能夠明顯影響機體的免疫調(diào)節(jié)機制，包括調(diào)節(jié)抗原呈遞、免疫激huo、免疫監(jiān)督等。不同免疫細胞來源的外泌體功能不同，以樹突狀細胞(該細胞具有免疫刺激能力，是目前能夠激huo初始T細胞的抗原遞呈細胞)來源的外泌體為例，其外泌體的免疫刺激作用取決于來源細胞的成熟狀態(tài)。成熟的樹突狀細胞外泌體內(nèi)包含能夠直接激huoT細胞的MHCclassⅠ和MHCclassⅡ，共刺激分子如CD40、CD8、CD86和熱激蛋白，這些分子使樹突狀細胞來源的外泌體具有抗原呈遞、調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的生物功能。

為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息，可以通過電鏡、動態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質(zhì)免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法、流式細胞儀等對外泌體進行表征。通過電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息，不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同，得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如，在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中，外泌體呈現(xiàn)囊泡獨有的茶托形，可能由于樣品在固定或染色過程中極度脫水，導(dǎo)致外泌體塌陷所致。與之相反，在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形，由于不會脫水變性，所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實狀態(tài)。另外，由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率，也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。外泌體的數(shù)量：人體中大約有1014個，近乎于平均每個細胞產(chǎn)生1000-10000個。

前列腺ai患者尿液外泌體中的miR-574-3p、miR-141-5p和miR-21-5p的表達水平明顯上升，表明這些miRNAs可用于前列腺ai的早期篩查。膽管ai是惡性程度較高的消化系統(tǒng)中流，發(fā)展隱蔽且臨床癥狀及體征出現(xiàn)晚，故給早期診斷帶來困難。高通量小RNA測序篩查了來自膽管ai和膽囊ai患者外泌體中一系列差異表達的miRNA，小RNA長度在正常個體、膽管ai患者和膽囊ai患者之間的分布存在明顯差異，膽管ai患者的外泌體中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p、miR-4732-3p明顯升高，而膽囊ai患者的外泌體中miR-151a-5p略有升高，為膽管ai和膽囊ai提供了一套新的生物診斷標志物。外泌體研究使用血漿樣本進行實驗較好。血液外泌體攝取

建立外泌體分離、表征以及效價測定的標準化方法將是外泌體作為診斷和診療用途之前需要解決的問題。唾液提取試劑盒分類

通過改變外泌體的溶解性或者分散性,可以將它們從體液或細胞培養(yǎng)液中沉淀出來。常見的方法是使用聚乙二醇或凝集素來沉淀樣品中的外泌體。聚乙二醇是一種水溶性非離子化合物,不含水的聚乙二醇可以通過“劫持”水分子增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力,從而迫使其脫離溶液,進而在低速離心條件下發(fā)生沉降。凝集素是一種具有高度特異性的碳水化合物結(jié)合蛋白,可通過與外泌體質(zhì)膜糖蛋白上的糖鏈結(jié)合來改變外泌體的溶解性。此外,還可使用魚精蛋白、醋酸鈉、有機溶劑沉淀等方法進行沉淀分離。唾液提取試劑盒分類

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