外泌體的提取分離方法：1、PEG-base沉淀法：聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀，早先應用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性），顆粒大小不均一，產生難以去除的聚合物，機械力或者吐溫-20等化學添加物將會破壞外泌體等，因此發(fā)表文章時易受質疑。2、試劑盒提?。航鼛啄陙?，市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒，有的是通過特殊設計的過濾器過濾掉雜質成分，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進行分離純化，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。外泌體可由間充質干細胞、淋巴細胞和腫細胞細胞等多種類型細胞主動分泌釋放。海洋生物外泌體lncRNA芯片

外泌體的提取方法：免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性，不便進行下一步的實驗。PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內注射。PS法可提取相當高純度的外泌體。色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備，應用不寬泛。羊奶提取試劑盒生產廠家外泌體觀察到它們可以在體內刺激免疫應答。

外泌體不只可作為疾病診斷的生物標志，而且可作為天然的藥物傳遞載體。外泌體能夠負載的治理物質包括小分子化合物、蛋白質、寡核苷酸等，且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。外泌體獨特的生物兼容性、高穩(wěn)定性、瘤靶向性使其在未來瘤治理中有很大的利用價值。外泌體能夠裝載的治理物質包括小分子化合物、蛋白質、寡核苷酸等。作為小分子化合物載體，外泌體裝載姜黃素、紫杉醇、阿霉素等主要是用于抗瘤研究；已經發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質，例如酶，細胞骨架蛋白質和跨膜蛋白質；外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理，外泌體天然的可以攜帶遺傳（例如miRNA，siRNA）到靶細胞中，從而在生物學和致病過程中誘導遺傳修飾。

Pascucci等將包含有紫杉醇的間充質細胞來源外泌體與胰腺ai細胞共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)裝載紫杉醇的間充質細胞外泌體具有很強的抗中流增殖效果。Tian等為降低免疫原性與毒性，采用小鼠未成熟樹突狀細胞所產生外泌體作為藥物載體。同時為實現(xiàn)外泌體運輸的靶向性，使細胞表達能夠識別乳腺ai細胞的外泌體膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b，溶酶體相關膜蛋白2)。并采用電穿孔的方法，在純化所得的小鼠未成熟樹突狀細胞外泌體中載入阿霉素。結果表明該外泌體能夠特異性的將阿霉素傳遞給中流組織，抑制中流生長且無明顯毒性。外泌體提純方法中，超速離心法和聚合物沉淀法（市售試劑盒）混入多種雜質。

外泌體（Exosome），是細胞外囊泡（EV）的一種主要類型，是直徑為30至150nm的納米大小的膜結構，大多數細胞都會分泌外泌體。外泌體存在于各種生物體液中，通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂質和代謝物等來發(fā)揮細胞間通訊功能，參與免疫應答、代謝和心血管疾病、神經退行性疾病以及病癥進展等多種生理和病理過程。在內體轉變?yōu)槌墒於嗄遗輧润w（MVE）的過程中，內體膜向腔內出芽形成腔內囊泡（ILV），MVE與細胞膜融合釋放ILV到細胞外，即形成外泌體。外泌體提取在短時間（一周之內）使用，可以放在4度保存，如果長時間保存可以放在-20度或-80度保存。廣州外泌體測序

高濃度集聚誘導細胞死亡的TNF-α，可使類風濕關節(jié)炎惡化。海洋生物外泌體lncRNA芯片

目前市面上開發(fā)的外泌體提取試劑盒，是根據外泌體表面由類似于細胞膜的脂質雙分子層具有一定疏水性這一特性，用試劑捆綁水分子，從而可通過常規(guī)離心收集沉淀獲取外泌體。這種快速提取外泌體的方法雖簡便快捷、樣本需求少、對設備要求低，但與差速離心方法類似，其分離得到的沉淀包含其他細胞分泌的囊泡，且血清中含有大量血清蛋白分子，成分復雜，很可能摻雜一些未知的疏水大分子物質。Sabapatha等曾根據來源于胎盤的外泌體表面特異表達這一特性，使用耦合到磁珠的抗抗體，采用磁珠分選方法分離血漿中胎盤來源外泌體。此法可以提取的胎盤外泌體量少，不適用于大規(guī)模提取制備，且免疫磁珠價格昂貴，不利于提取技術的普及。海洋生物外泌體lncRNA芯片

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