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貴州免疫組化價(jià)格

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-03-26

確定來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位,臨床上免疫組化也可以進(jìn)行操作。對(duì)于來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤,用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來(lái)源,進(jìn)一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽(yáng)性,而在肺cancer、乳腺cancer、腎cancer中陰性;Tg陽(yáng)性可考慮甲狀腺轉(zhuǎn)移;波形蛋白(Vimentin)陽(yáng)性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽(yáng)性可考慮前列腺轉(zhuǎn)移;甲狀腺球蛋白陽(yáng)性可考慮甲狀腺濾泡細(xì)胞cancer;肌動(dòng)蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin)、結(jié)蛋白(Desmin)、肌紅蛋白(Myoglobin)陽(yáng)性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽(yáng)性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫(yī)療及預(yù)后提供了依據(jù)。大鼠、小鼠組織免疫組化,找英瀚斯生物。貴州免疫組化價(jià)格

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免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片? 

(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是***我向一老師請(qǐng)教得出的結(jié)論。因?yàn)樽魇炃衅瑫r(shí)要高溫烤片,可能會(huì)破壞組織的抗原性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。

(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,做免疫組化時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),可能會(huì)使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒(méi)石蠟的漂亮。當(dāng)你買一抗時(shí),目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。

(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來(lái)做原位雜交的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。

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細(xì)胞爬片免疫組化檢測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟

1、選擇貼壁良好的細(xì)胞爬片,用4%多聚甲醛固定后15min后自然晾干。

2、PBS洗3次,每次5min。3、切片放入3%過(guò)氧化氫溶液,室溫下孵育10min,以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。

4、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封閉20min(封閉電荷)。

5、去除BSA液,每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織,4℃過(guò)夜。

6、PBS洗3次,每次5min。


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7、去除PBS液,每張切片加50μl-100μl相應(yīng)種屬的二抗,4℃孵育50min。

8、PBS洗3次,每次5min。

9、去除PBS液,每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液,顯微鏡控制顯色。

10、顯色完全后,蒸餾水或自來(lái)水沖洗,蘇木素復(fù)染,1%鹽酸酒精分化(1s),自來(lái)水沖洗,氨水返藍(lán),流水沖洗。

11、切片經(jīng)過(guò)梯度酒精(70-100%)10min一個(gè)梯度,脫水干燥,二甲苯透明,中性樹(shù)膠封固。

免疫組化的抗原修復(fù)技術(shù)

抗原修復(fù)是免疫組化實(shí)驗(yàn)中的重要步驟,目的是暴露被固定過(guò)程掩蓋的抗原表位。常用的抗原修復(fù)方法有熱修復(fù)和酶消化。免疫組化熱修復(fù)是通過(guò)加熱(如微波或高壓)使蛋白質(zhì)變性,暴露抗原表位。常用的緩沖液有檸檬酸鹽緩沖液和EDTA緩沖液。酶消化是通過(guò)蛋白酶(如胰蛋白酶)消化部分蛋白質(zhì),暴露抗原表位。免疫組化實(shí)驗(yàn)中不同的抗原修復(fù)方法適用于不同的抗原和抗體,需要根據(jù)免疫組化具體實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化調(diào)整。 免疫組化檢測(cè)多少錢?

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關(guān)于免疫組化,抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái),以此作為抗原或半抗原,通過(guò)免疫動(dòng)物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測(cè)組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無(wú)色的,因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來(lái),以其達(dá)到對(duì)組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性,定位或定量的研究。南京英瀚斯生物科技有限公司有設(shè)計(jì)免疫組化的實(shí)驗(yàn)哦!如果您對(duì)此有希望了解更多,可以與我們聯(lián)系!免疫組化結(jié)果怎么看?做得好的免疫組化外包

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免疫組化的顯色系統(tǒng)

免疫組化的顯色系統(tǒng)是將抗原-抗體反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可見(jiàn)信號(hào)的關(guān)鍵步驟。常用的免疫組化顯色系統(tǒng)有DAB(3,3'-二氨基聯(lián)苯胺)和AEC(3-氨基-9-乙基咔唑)。DAB顯色產(chǎn)生棕色沉淀,適用于光學(xué)顯微鏡觀察。AEC顯色產(chǎn)生紅色沉淀,適用于光學(xué)顯微鏡觀察,但不適合長(zhǎng)期保存。此外,還有熒光顯色系統(tǒng),如FITC(異硫氰酸熒光素)和TRITC(四甲基羅丹明異硫氰酸酯),適用于熒光顯微鏡觀察。選擇合適的顯色系統(tǒng)需要考慮實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜋z測(cè)設(shè)備。 貴州免疫組化價(jià)格