免疫組化實驗流程介紹：

英瀚斯生物為您整理總結(jié)免疫組化詳細(xì)步驟：

1、SP三步法

1）石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。

2）0.3%或3%H2O2去離子水（無色液體）孵育10-30分鐘，以滅活內(nèi)源性過氧化物酶活性。

3）蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘

4）候選步驟：采用抗原修復(fù)：微波（建議30分鐘內(nèi)4次中火）、高壓、酶修復(fù)方法。自然冷卻，再用3分鐘×3次.

5）血清封閉：室溫15-30分鐘，盡可能與二抗來源一致。傾去，勿洗。

6）滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2~3小時或4℃過夜（比較好復(fù)溫）。PBS沖洗，3分鐘×5次。

7）滴加生物素標(biāo)記的二抗，室溫或37℃孵育30分鐘-1h。

8）PBS沖洗，3分鐘×5次。

9）滴加SP（鏈霉親和素-過氧化物酶），室溫或37℃孵育30分鐘-1h。

10）PBS沖洗，3分鐘×5次。

11）顯色劑顯色（DAB等）。

12）自來水充分沖洗。

13）可進(jìn)行復(fù)染，脫水，透明。

14）選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?英瀚斯生物做免疫組化怎么樣？浙江組織免疫組化要多少錢

免疫組化指的是根據(jù)抗體與抗原特異結(jié)合的原理來檢測組織切片中的抗原（如蛋白）。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體，而histo意味著組織。另一種類似的技術(shù)是免疫細(xì)胞化學(xué)（Immunocytochemistry，簡稱ICC）。這兩個詞大家經(jīng)?；熘茫粗孟癫畈欢?，但實際上還是有點區(qū)別。IHCvsICC對于IHC，組織是來自患者或動物，經(jīng)過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片，封片后再處理。通過這種方法，研究人員可觀察細(xì)胞組分的定位，同時維持周圍組織的原先結(jié)構(gòu)。對于ICC，大部分細(xì)胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除，只剩下整個細(xì)胞來染色。ICC的來源可以是細(xì)胞懸液，來自患者或動物（如血涂片、拭子等），或在實驗室中進(jìn)行的組織培養(yǎng)細(xì)胞系。 山東做得好的免疫組化實驗做免疫組化意味什么？

關(guān)于免疫組化，抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性，免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來，以此作為抗原或半抗原，通過免疫動物后獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無色的，因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來，以其達(dá)到對組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性，定位或定量的研究。南京英瀚斯生物科技有限公司有設(shè)計免疫組化的實驗哦！如果您對此有希望了解更多，可以與我們聯(lián)系！

免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床cancer良惡性的判斷，英瀚斯生物為您介紹。對于反應(yīng)性增生還是cancer性增生，可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測B淋巴細(xì)胞增生的單克隆或多克隆性來區(qū)別。在濾泡反應(yīng)性增生時，濾泡反應(yīng)中心的細(xì)胞不表達(dá)細(xì)胞凋亡蛋白(bcl-2)，bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中，由于90%以上cancer性濾泡細(xì)胞有bcl-2的高表達(dá)，bcl-2陽性。而增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)，周期素(Cycling)，核抗原(Ki-67)通過對cancer細(xì)胞增生的程度作出評價，從而提示增生細(xì)胞的良惡性。免疫組化protocol，詳情請看英瀚斯生物官網(wǎng)。

英瀚斯生物為您整理免疫組化實驗步驟

1、石蠟切片置于65℃烘箱中烘片2h，脫蠟至水，用PBS沖洗三次，每次5min。

2、切片置于EDTA緩沖液中微波修復(fù)，中火至沸后斷電，間隔10min低火至沸。

3、自然冷卻后PBS洗3次，每次5min。4、切片放入3%過氧化氫溶液，室溫下孵育10min，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶。

5、PBS洗3次，每次5min，甩干后5%BSA封閉20min（封閉電荷）。

6、去除BSA液，每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織，4℃過夜。

7、PBS洗3次，每次5min。

8、去除PBS液，每張切片加50μl-100μl相應(yīng)種屬的二抗，4℃孵育50min。

9、PBS洗3次，每次5min。

10、去除PBS液，每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液，顯微鏡控制顯色。

11、顯色完全后，蒸餾水或自來水沖洗，蘇木素復(fù)染，1%鹽酸酒精分化（1s），自來水沖洗，氨水返藍(lán)，流水沖洗。

12、切片經(jīng)過梯度酒精（70-100%）10min一個梯度，脫水干燥，二甲苯透明，中性樹膠封固。 免疫組化常見問題原因分析！陜西切片免疫組化價格

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免疫組化技術(shù)有哪些應(yīng)用？

定位和定性是免疫組化比較大的優(yōu)勢。相比于其他蛋白檢測方法，免疫組化具有定位較直接準(zhǔn)確、定性靈敏度高，是定位檢測分析優(yōu)先方法，尤其對于有些因子的轉(zhuǎn)位研究十分有用。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面：惡性**的診斷與鑒別定性；確定轉(zhuǎn)移性惡性**的原發(fā)部位；對某類**進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型；軟組織**診斷；為臨床提供治療方案的選擇；近年來，隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn)，使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認(rèn)可，其在低分化或未分化**的鑒別診斷時，準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。

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