HE染色細(xì)胞核灰藍(lán)原因:(1)組織處理溫度過高、過熱,在石蠟停留的時間過長;(2)固定時間太短,接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對策:理論上來說,加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用,組織不能在熱的蠟液中停留過長時間。如果由于某些原因不能進(jìn)行下步包埋處理,完成浸蠟處理后的組織,可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中,冷卻凝固,以備包埋。待需要包埋時再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好,脫水比較好能從低濃度的乙醇開始。HE染色中固定液如何配置。青海比較好的HE染色
HE染色細(xì)胞質(zhì)過染分析及應(yīng)對原因:(1)伊紅染色液濃度太高,特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在;(2)切片在伊紅染色時間過長;(3)切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時過的太快,而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生。對策:適當(dāng)稀釋伊紅染色液,減少伊紅染色時間,或者使切片在乙醇脫水等步驟時,停留時間相對均勻。同樣,也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對原因:蘇木精染色液中的金屬膜,黏附在玻片上。對策:每天染色前仔細(xì)過濾蘇木精染色液,或建議使用半氧化蘇木精染色液,如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生。青??孔V的HE染色報告心臟組織HE染色如何觀察。
HE染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,經(jīng)過固定后,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進(jìn)行常規(guī)切片。如果脫鈣不全,則切片容易撕開或碎裂,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程,稱為脫鈣。骨組織固定24小時后,鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,進(jìn)行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間,但長時間浸于強(qiáng)酸會影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水、浸蠟、切片進(jìn)行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。
HE染色常見問題:成片的染色模糊不清,灰染答:(1)組織未及時固定,部分自溶;或固定不佳,深部組織未處理到。這種只能重新固定了。(2)盡管乙醇也是一種固定液,但盡量少用或不用,因?yàn)槠鋾?dǎo)致組織發(fā)硬變脆,染色效果不好。(3)包埋時蠟的溫度過高,或切片后烤片時間和溫度過久過高都不好,可能會導(dǎo)致無法染色。(4)脫蠟不徹底;染料有問題;分化過度導(dǎo)致的顏色變淡,鏡下組織界限不清;染完后的脫水和透明不佳,水霧殘留在組織上。(5)通風(fēng)窗中(防止空氣中的水霧),戴口罩操作封片(減少哈氣帶來的水霧)。HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片。
HE染色原理:一、細(xì)胞核染色原理:蘇木精為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。二、細(xì)胞漿染色原理:細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時,胞漿對外不顯電性,此時酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時,大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值,表現(xiàn)酸性電離,而帶負(fù)電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染色,現(xiàn)時胞核也被染色,核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負(fù)電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對比HE染色是常見的病理染色,是比較基礎(chǔ)是病理染色之一。寧夏值得信賴的HE染色多少錢
骨組織HE染色的操作流程。青海比較好的HE染色
HE染色病理技術(shù)中**常用的一種方法,通過它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,以達(dá)到準(zhǔn)確,完整的病理診斷。一、染色目的 病理學(xué)的所有切片,都必須通過一種以上的染料,通過各種不同的方法,將切片中各種不同的物質(zhì),在不同染液的作用下,將其顯示出來,使之在光學(xué)顯微鏡下,能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu)。例如,HE染色,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出多不同的結(jié)構(gòu),細(xì)胞核著藍(lán)黑色,細(xì)胞漿著粉紅色,軟骨著藍(lán)色等。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供的依據(jù),因此,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,必須不斷地總結(jié),方能提高。青海比較好的HE染色