病理實驗外包,病理染色常見染色介紹甲苯胺藍(lán)染色:甲苯胺藍(lán)(Toloniumchloride),是一種化合物,分子式為C28H20N2O10S2·2Na,分子量為656.62,甲苯胺藍(lán)深綠色粉末,具古銅色光澤,易溶于水,呈藍(lán)紫色溶液。微溶于醇呈藍(lán)色,極微溶于氯仿,幾乎不溶于醚。商品大部分為氯化鋅復(fù)鹽。主要用于氧化還原指示劑。用于眼科檢查角膜缺陷和損傷部分,組織化學(xué)中用于測定脫氧核糖核酸和診斷白喉。甲苯胺藍(lán)是常用的人工合成染料的一種,屬于醌亞胺染料類,這類染料一般含有兩個發(fā)色團(tuán),一個是胺基,一個是醌型苯環(huán),來構(gòu)成色原顯色。染料除有發(fā)色團(tuán)外,還要有能使色原對組織及其他被染物產(chǎn)生親和力的原子團(tuán)即助色。助色團(tuán)能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類,幫助發(fā)色團(tuán)對組織產(chǎn)生染色力,使切片上的組織細(xì)胞著色。甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個發(fā)色團(tuán),還含有兩個助色團(tuán),為堿性染料,甲苯胺藍(lán)中的陽離子有染色作用,組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽離子相結(jié)合而被染色。軟骨基質(zhì)對甲苯胺藍(lán)的異染性,是因為軟骨基質(zhì)的主要成分是軟骨黏蛋白、多糖物質(zhì),而酸性硫酸根與嗜堿性染料有親和力。病理實驗外包所需樣本如何保存。陜西組織病理實驗外包
病理實驗外包,病理染色組織處理的要求:恰當(dāng)?shù)慕M織處理是做好免疫組化染色的先決條件,也是決定染色成敗的內(nèi)部因素,在組織細(xì)胞材料準(zhǔn)備的過程中,不僅要求保持組織細(xì)胞形態(tài)完整,更要保持組織細(xì)胞的抗原性不受損或彌漫,防止組織自溶。如果出現(xiàn)自溶壞死的組織,抗原已經(jīng)丟失,即使用很靈敏的檢測抗體和高超的技術(shù),也很難檢出所需的抗原,反而往往由于組織的壞死或制片時的刀痕擠壓,在上述區(qū)域易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。組織及時取材和固定組織標(biāo)本及時的取材和固定是做好免疫組化染色的關(guān)鍵第一步,是有效防止組織自溶壞死,抗原丟失的開始,離體組織應(yīng)盡快的進(jìn)行取材,比較好2h內(nèi),取材時所用的刀應(yīng)銳利,要一刀下去切開組織,不可反復(fù)切拉組織,造成組織的擠壓,組織塊大小要適中,一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm,切記取材時組織塊寧可面積大,千萬不能厚的原則,(也就是說組織塊的面積可以大到3cm×5cm,但組織塊的厚度千萬不能超過0.2cm,否則將不利于組織的均勻固定)。固定液快速滲透到組織內(nèi)部使組織蛋白能在一定時間內(nèi)迅速凝固。從而完好的保存抗原和組織細(xì)胞形態(tài)。天津靠譜的病理實驗外包檢測南京病理實驗外包檢測公司,科研課題解決方案。
病理實驗外包,冰凍切片取樣實驗步驟:一、取材應(yīng)盡可能快地采取新鮮的材料,防止組織發(fā)生死后變化。二、速凍1.將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)(直徑約2cm)。2.如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi)。3.當(dāng)盒底部接觸液氮時即開始?xì)饣序v,此時小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10~20s組織即迅速冰結(jié)成塊。4在制成凍塊后,即可置入恒冷箱切片機(jī)冰凍切片。5.若需要保存,應(yīng)快速以鋁箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱貯存?zhèn)溆?。三、固?.樣品托上涂一層OCT包埋膠,將速凍組織置于其上,4℃冰箱預(yù)冷5~10min讓OCT膠浸透組織。2.取下組織置于錫箔或者玻片上,樣品托速凍。3.組織置于樣品托上,其上再添一層OCT膠,以完全覆蓋為宜,速凍架(PE)上30min。
病理實驗外包,染色常見染色介紹天狼星紅染色:主要由天狼星紅染色液、Mayer蘇木素染色液組成,主要用于各種組織病變時對膠原纖維異?;蚶w維增生的研究中,在普通光學(xué)顯微鏡下心臟血管等組織的膠原纖維被染成紅色,在偏振光鏡下對各種纖維化病變的分型和分級研究有一定的幫助作用。采用免疫組化技術(shù)也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維,但所用抗體昂貴,操作費時,而采用天狼星紅染色試劑便宜,操作簡單。天狼星紅染色液操作步驟1、組織固定于10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。2、切片厚6μm,常規(guī)脫蠟至水。3、天狼星紅染色液滴染1h。4、流水稍沖洗,去除切片表面染液。5、Mayer蘇木素染色液染細(xì)胞核8~10min。6、流水沖洗10min。7、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。天狼星紅染色可用作肝纖維化以及腎纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。不容錯過的病理實驗外包研究方法,南京英瀚斯生物。
●原因:①組織脫水,透明不夠。②浸蠟時間過長、浸蠟溫度過高。③組織脫出是由于脫水、透明時間不夠,或組織中含有乙醇等,石蠟不易滲入組織中故導(dǎo)致石蠟與組織分離。④二甲苯使用時間過久。●解決方法:①必須按組織大小厚薄選擇脫水、透明時間。②依組織的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點確定浸蠟時間、控制包埋溫度。一般這種情況難以補(bǔ)救。③脫水,透明滲蠟不夠,應(yīng)重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再進(jìn)行滲蠟包埋。④更換二甲苯。2.切片皺褶太多且不能完全展開●原因:①石蠟太軟或室溫過高。②切片刀上粘有殘余的石蠟,刀口不干凈。③組織浸蠟時間不夠或脫水、透明不夠。④切片刀不鋒利?!窠鉀Q方法:①可將蠟塊放入冰箱中冰凍后切片。并在切片時一邊切片一邊用冰塊冰凍或換蠟。如室溫過高,可開空調(diào)降低室溫。②切片刀不干凈,可用棉花沾少許二甲苯將刀口拭干凈。③組織浸蠟不夠,可重復(fù)浸蠟過程。④將切片刀磨銳利再行切片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。電鏡檢測,病理實驗外包選南京英瀚斯。青??孔V的病理實驗外包
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病理實驗外包,病理染色膠原纖維染色法1.VanGieson(V.G)***-酸性品紅法鮮紅色:膠原纖維黃色:肌纖維、細(xì)胞質(zhì)、紅細(xì)胞藍(lán)褐色:胞核2.天狼星紅(Siriusred)***染色法紅色:膠原纖維綠色:細(xì)胞核黃色:其他另:天狼星紅***染色法:(偏光顯微鏡)Ⅰ型:強(qiáng)雙折光性,呈黃色或紅色纖維Ⅱ型:弱雙折光,呈多種色彩疏網(wǎng)狀分布Ⅲ型:弱雙折光,呈綠色的細(xì)纖維Ⅳ型:弱雙折光的基膜,呈淡黃色 公司自建有標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)房,配備有生物安全柜、超凈工作臺、三氣細(xì)胞培養(yǎng)箱、二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱、熒光倒置顯微鏡、體視鏡、酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀等設(shè)備。陜西組織病理實驗外包
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