HE染色細(xì)胞漿染色原理：細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系，當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí)，胞漿對(duì)外不顯電性，此時(shí)酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí)，大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值，表現(xiàn)酸性電離，而帶負(fù)電荷的陰離子，可被帶正電荷的染料染色，現(xiàn)時(shí)胞核也被染色，核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽(yáng)離子），就可被帶負(fù)電荷（陰離子）的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷（陽(yáng)離子）結(jié)合而使細(xì)胞漿染色，細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織，嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比。HE染色的基本原理和結(jié)果分析。天津值得信賴(lài)的HE染色公司

HE染色常見(jiàn)問(wèn)題：Q3：細(xì)胞核染色過(guò)淺，顏色暗淡答：切片在蘇木素染液中停留過(guò)短，或蘇木素過(guò)度氧化失效，或分化時(shí)間太長(zhǎng)。對(duì)策：重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液，每個(gè)3-5min即可，接著重新染色。可以適當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h，自來(lái)水沖洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h，自來(lái)水沖洗10min染色。Q4：細(xì)胞核染色過(guò)深，胞漿著藍(lán)色答：切片在蘇木素染液中停留過(guò)長(zhǎng)；或切片太厚；或分化時(shí)間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，專(zhuān)業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。陜西性?xún)r(jià)比高的HE染色外包HE染色結(jié)果如果使用計(jì)算機(jī)分析軟件分析？

HE染色組織樣本水化：將浸泡過(guò)二甲苯的待測(cè)組織樣本先放入無(wú)水乙醇中浸泡5min，使脫蠟時(shí)用的二甲苯可以被洗脫出去，使水可以進(jìn)入組織中；再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡５min以達(dá)到充分水化的效果。組織切片蘇木素染色、分化與反藍(lán)：將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗，每次浸泡５min，總共清洗３次。之后用移液***吸取已經(jīng)預(yù)先配制好的蘇木素染色液，每個(gè)組織切片滴加100ul，充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進(jìn)行分化，使細(xì)胞核中結(jié)合過(guò)多的染液和細(xì)胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后，再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇木素染藍(lán)色，使用弱堿性的促藍(lán)液加入組織切片中，讓細(xì)胞核染藍(lán)色。反藍(lán)結(jié)束后先用清水進(jìn)行清洗，再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。

HE染色常見(jiàn)問(wèn)題：Q5：細(xì)胞核呈棕紅色改變答：蘇木素染液過(guò)度氧化；或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液。或在流動(dòng)自來(lái)水(一般自來(lái)水PH7.5-7.8)，或在稀釋的氨水溶液，或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡，這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6：伊紅染色較淡答：伊紅的PH改變了(PH可能已大于5)；或反藍(lán)液體未漂洗干凈，殘留后影響胞漿嗜酸性染色；或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過(guò)久。對(duì)策：檢查伊紅染色液PH，可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示，調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。HE染色規(guī)范化流程以及注意事項(xiàng)。

HE染色常見(jiàn)問(wèn)題：切片染色不均勻，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時(shí)組織太厚，固定過(guò)久，導(dǎo)致深部組織固定不佳，而表淺組織過(guò)度固定，而透明、脫水、浸蠟均是如此，這樣在后期染色時(shí)就會(huì)出現(xiàn)染色不均勻。應(yīng)該將厚的組織剖開(kāi)固定。（2）制片過(guò)程有問(wèn)題，切片厚薄不一，或者有刀痕，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一，一般都是在制片時(shí)，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時(shí)間過(guò)短或脫蠟液使用過(guò)久，導(dǎo)致脫蠟不徹底。（4）染色液過(guò)少，著色不均勻；或染色時(shí)部分組織干涸而另一部分濕潤(rùn)，這樣會(huì)導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當(dāng)。南京英瀚斯，專(zhuān)業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。HE染色需要哪些材料及實(shí)驗(yàn)步驟。青?？孔V的HE染色多少錢(qián)

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HE染色觀察肝臟HE染色切片，首先要在顯微鏡下找到肝臟的標(biāo)志性結(jié)構(gòu)——肝小葉。顯微鏡首先調(diào)4倍物鏡，調(diào)準(zhǔn)焦螺旋至視野清晰，可以看到肝小葉結(jié)構(gòu)。人的肝小葉之間結(jié)締組織少，小葉分隔不明顯，但動(dòng)物如豬或小鼠，其肝小葉分界非常明顯。肝小葉**有**靜脈，在橫切片上顯示為空洞。肝小葉之間為將物鏡調(diào)制10倍或20倍，就可以清楚地看到肝小葉結(jié)構(gòu)。肝細(xì)胞以**靜脈為中心向周?chē)派錉钆帕?，稱(chēng)為肝板。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細(xì)胞。20倍物鏡下，肝細(xì)胞內(nèi)染色為藍(lán)色的是細(xì)胞核，細(xì)胞核大而圓，居中，異染色質(zhì)少而著色淺，能清晰看到核仁。肝細(xì)胞胞質(zhì)豐富，多成嗜酸性，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成旺盛時(shí)，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)散在的嗜堿性物質(zhì)。肝細(xì)胞內(nèi)有豐富的細(xì)胞器比如溶酶體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，等等，但是在光鏡下是無(wú)法看到的，需要在電鏡下才能觀察到。當(dāng)然，肝小葉內(nèi)除了肝細(xì)胞，還有膽小管、肝血竇、肝巨噬細(xì)胞等組織形態(tài)，但是在HE染色時(shí)并不容易觀察到。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細(xì)胞形態(tài)是否完整、胞核有無(wú)增大、肝小葉形態(tài)是否完整，以檢測(cè)藥物等刺激因素對(duì)肝臟的損傷作用。天津值得信賴(lài)的HE染色公司

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