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它還通過(guò)測(cè)定紫外光譜范圍內(nèi)強(qiáng)度峰值位置的精確度來(lái)確定波長(zhǎng)的系統(tǒng)及隨機(jī)誤差。遵照這些建議來(lái)維護(hù)分光光度計(jì),那么在今后的使用過(guò)程中再也不用擔(dān)心測(cè)量結(jié)果有問(wèn)題啦。分光光度法始于牛頓(Newton)。早在1665年牛頓作了一介罈人的實(shí)驗(yàn):他讓太陽(yáng)光透過(guò)暗室窗上的小圓孔,在室內(nèi)形成很細(xì)的太陽(yáng)光束,該光束經(jīng)棱鏡色散后,在墻壁上呈現(xiàn)紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫的色帶。這色帶就稱為“光譜”。頓通過(guò)這個(gè)實(shí)驗(yàn);揭示了太陽(yáng)光是復(fù)合光的事實(shí)。分光光度計(jì)的測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380~780 nm的可見(jiàn)光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。海南國(guó)產(chǎn)分光光度計(jì)
5、WFZ800-DA、756型等分光光度計(jì),由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測(cè)微弱光電信號(hào),而不能用來(lái)檢測(cè)強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號(hào)漂移,靈敏度下降。針對(duì)其上述特點(diǎn),在維修、使用此類儀器時(shí)應(yīng)注意不讓光電倍增管長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,因此在預(yù)熱時(shí),應(yīng)打開(kāi)比色皿蓋或使用擋光桿,避免長(zhǎng)時(shí)間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。6、放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零。7、比色杯的配套性問(wèn)題。比色杯必須配套使用,否則將使測(cè)試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測(cè)試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下:分別向被測(cè)的兩只杯子里注入同樣的溶液,把儀器置于某一波長(zhǎng)處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個(gè)池的透射比值調(diào)至100%,測(cè)量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在,若超出此范圍應(yīng)考慮其對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。典型故障及其排除方法1、儀器不能調(diào)零??赡茉颍篴.光門不能完全關(guān)閉。解決方法:修復(fù)光門部件,使其完全關(guān)閉。b.透過(guò)率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕。c.儀器嚴(yán)重受潮。解決方法:可打開(kāi)光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會(huì)兒使其干燥。遼寧紫外可見(jiàn)分光分光光度計(jì)操作單光束分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、價(jià)格便宜,但由于其雜散光、光源波動(dòng)等影響很大,所以準(zhǔn)確度較差。
分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對(duì)應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個(gè)吸收峰的波長(zhǎng)。由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,對(duì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時(shí)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
兩束光合為一束。并交替通過(guò)入射狹縫進(jìn)入單色器中,經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上,色散并通過(guò)出射狹縫之后,被濾光片濾除高級(jí)次光譜,再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測(cè)器的接收面上。探測(cè)器將上述交變的信號(hào)轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號(hào),經(jīng)放大器進(jìn)行電壓放大后,轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位,計(jì)算機(jī)處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。元析儀器紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)二、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的概述不同:1、紫外分光光度計(jì)的概述:根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是比較大吸收波長(zhǎng)λmax和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很***的應(yīng)用。在國(guó)內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的比較大吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。2、紅外分光光度計(jì)的概述:由光源發(fā)出的光,被分為能量均等對(duì)稱的兩束,一束為樣品光通過(guò)樣品,另一束為參考光作為基準(zhǔn)。這兩束光通過(guò)樣品室進(jìn)入光度計(jì)后,被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制,形成交變信號(hào)。三、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的應(yīng)用不同:1、紫外分光光度計(jì)的應(yīng)用:將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測(cè)定紫外可見(jiàn)吸收光譜。關(guān)于儀器的系統(tǒng)誤差,可通過(guò)對(duì)分光光度計(jì)的定期校正來(lái)克服,若所需準(zhǔn)確度很高的測(cè)量,則必須天天校正。
試劑盒包含一個(gè)空白濾光片、三個(gè)檢查光度的濾光片和三個(gè)校正波長(zhǎng)的濾光片。每個(gè)濾光片的吸光值是相對(duì)空白濾光片測(cè)定的。這個(gè)試劑盒不僅能讓用戶獲得測(cè)量準(zhǔn)確性的信息,也能提供精確度的信息,包括平均值和變異系數(shù)。在測(cè)量準(zhǔn)確性和精確度時(shí),將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測(cè)得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長(zhǎng)時(shí),測(cè)定三個(gè)測(cè)試濾光片在對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)(260nm、280nm和800nm)下的吸光度,以確定每個(gè)波長(zhǎng)的變異系數(shù)。許多分光光度計(jì),包括Eppendorf的所有儀器,都帶有一個(gè)特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶至少每周運(yùn)行一次自檢,但自動(dòng)自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個(gè)部分。它通過(guò)測(cè)定現(xiàn)有波長(zhǎng)的隨機(jī)誤差來(lái)校驗(yàn)檢測(cè)器,通過(guò)檢查大能量、隨機(jī)誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號(hào)和光強(qiáng)度來(lái)校驗(yàn)光源。它還通過(guò)測(cè)定紫外光譜范圍內(nèi)強(qiáng)度峰值位置的精確度來(lái)確定波長(zhǎng)的系統(tǒng)及隨機(jī)誤差。遵照這些建議來(lái)維護(hù)分光光度計(jì),那么在今后的使用過(guò)程中再也不用擔(dān)心測(cè)量結(jié)果有問(wèn)題啦。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是理化實(shí)驗(yàn)室常用的分析儀器。吉林原子吸收分光分光光度計(jì)選購(gòu)
在使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)試過(guò)程中可能出現(xiàn)出現(xiàn)自檢時(shí)提示波長(zhǎng)自檢出錯(cuò)的情況。海南國(guó)產(chǎn)分光光度計(jì)
點(diǎn)擊上方藍(lán)字關(guān)注“公眾號(hào)”分光光度計(jì)分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)核酸或者蛋白樣品濃度**常用的工具之一。儀器使用頻繁,但甚少見(jiàn)到有人維護(hù)。其實(shí),保持分光光度計(jì)清潔、無(wú)污染是成功操作的關(guān)鍵。清潔儀器我們應(yīng)該用蘸有中性清潔劑的軟布擦拭分光光度計(jì)的表面。刺激性的清潔劑可能會(huì)損壞儀器表面。你也可以清潔比色皿本身。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或異丙醇的無(wú)絨棉簽來(lái)清潔。這可防止液體進(jìn)入內(nèi)部。如果你必須要用水清潔,那么可用蘸有乙醇或異丙醇的棉簽來(lái)加速干燥。比色皿插槽的蓋子也可以清潔,但不是泡在清潔劑中。如有必要,拆下蓋子,用蘸有溫和清潔劑的軟布或無(wú)絨棉簽來(lái)清潔。此外,平時(shí)不使用時(shí),應(yīng)蓋上比色皿插槽的蓋子,以免灰塵或其他污染物落入。消毒和凈化如果分光光度計(jì)被微生物所污染,那么可采用下列步驟進(jìn)行消毒和凈化。首先,利用溫和的清潔劑來(lái)清潔設(shè)備。然后,用蘸有消毒劑(通常是酒精溶液)的軟布擦拭表面。如有必要,拆下并清潔比色皿插槽。檢查組件維護(hù)的另一方面在于檢查分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確性。Eppendorf提供了一個(gè)濾光片系統(tǒng)(BioSpectrometerreferencefilterkit),以評(píng)估光度準(zhǔn)確性和系統(tǒng)的波長(zhǎng)誤差。海南國(guó)產(chǎn)分光光度計(jì)