什么樣本可以做二代測序？①

1、血液樣本

全血：這是最常見的樣本類型之一。血液中含有白細胞，其細胞核內(nèi)有完整的基因組DNA。通過提取白細胞中的DNA，可以進行全基因組測序、全外顯子組測序等。例如，在遺傳病的基因診斷中，抽取患者的全血，提取DNA后，對與疾病相關(guān)的基因或整個外顯子組進行測序，以尋找致病突變。

血漿/血清：其中含有游離的DNA（cfDNA）和RNA（cfRNA）。在**患者中，腫瘤細胞會釋放其DNA片段進入血液循環(huán)，這些cfDNA被稱為循環(huán)**DNA（ctDNA）。通過對血漿中的ctDNA進行測序，可以實現(xiàn)**的早期篩查、***過程中的動態(tài)監(jiān)測等。例如，對于肺*患者，檢測血漿中的ctDNA來追蹤**的基因突變情況，為靶向***提供依據(jù)。 二代測序廣泛應(yīng)用于個性化醫(yī)學(xué)。吉林二代測序原理

二代測序技術(shù)在不同人群中的準(zhǔn)確性有何差異③

孕婦及胎兒

優(yōu)勢：無創(chuàng)產(chǎn)前篩查（NIPT）是二代測序技術(shù)用于孕期胎兒常見染色體非整倍體篩查的應(yīng)用，對于唐氏綜合征、18-三體綜合征、13-三體綜合征等染色體異常疾病的檢測準(zhǔn)確率分別能達到95%、85%、75%以上，明顯高于傳統(tǒng)血清學(xué)篩查。

局限性：孕婦外周血中胎兒游離DNA來源于胎盤滋養(yǎng)細胞，可能與胎兒實際情況不一致，導(dǎo)致假陽性。母親若合并免疫疾病、凝血功能障礙等，會使外周血中游離DNA含量過高，掩蓋胎兒來源的游離DNA，造成假陰性510. 河南哪里有二代測序公司二代測序的優(yōu)勢是高準(zhǔn)確性。

一代、二代、三代測序的技術(shù)原理和技術(shù)特點分別是什么？

技術(shù)原理：

一代—雙脫氧終止法

二代—橋式PCR+4色熒光可逆終止+激光掃描成像

三代—PacBio SMRT測序技術(shù)

技術(shù)特點：

一代—只能檢測序列一致的PCR產(chǎn)物；讀長可以較長，比如Sanger可以達到幾百bp；通量低，一次只能檢測少量的序列；成本低；

二代—可以并行測序；需要放大信號才能檢測；通量大，可以產(chǎn)生上G的reads；讀長較短，一-般是固定的，比如50、100、150、250等；成本較高

三代：可以并行測序；不需要放大信號，對單個分子進行測序；通量大，比如SequelII平臺，一張芯片可以有800萬個ZMW；讀長較長；測序精確度較差；成本高；

二代測序的建庫步驟③

三、末端修復(fù)和加A尾（以DNA文庫為例）

末端修復(fù)：經(jīng)過片段化后的DNA末端可能是不平齊的，有5'-突出端或3'-突出端。末端修復(fù)反應(yīng)可以利用T4DNA聚合酶、Klenow片段等酶，將這些末端補平，使其成為平末端。T4DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性，在合適的反應(yīng)緩沖液和dNTP（脫氧核糖核苷三磷酸）存在下，可以將突出的末端補平。

加A尾：在末端修復(fù)后的平末端DNA分子的3'-末端加上一個A堿基。這一步是為了后續(xù)連接帶有T-突出端的接頭做準(zhǔn)備，一般使用Klenow片段（3'→5'外切酶活性缺失）在dATP存在下進行加A反應(yīng)，這樣可以使DNA片段能夠高效地與帶有T-突出端的測序接頭連接。 二代測序的工作原理是什么？

二代測序技術(shù)的一些***研究進展①

疾病診斷與***領(lǐng)域 ：消化系統(tǒng)**標(biāo)志物檢測：2024 年的**共識指出，二代測序（NGS）技術(shù)可同時檢測消化系統(tǒng)**中的多種標(biāo)志物，如錯配修復(fù)基因變異、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI）狀態(tài)、**突變負荷（TMB）等，為**的精細***提供了更***、準(zhǔn)確的信息。例如，MSI-H 的實體瘤患者可使用帕博利珠單抗進行***，而 NGS 技術(shù)能更好地檢測 MSI 狀態(tài)及相關(guān)耐藥機制。

**液體活檢：通過檢測血液中的循環(huán)** DNA（ctDNA）等標(biāo)志物，實現(xiàn)對**的早期篩查、診斷和***監(jiān)測。NGS 技術(shù)能夠更敏感地檢測到 ctDNA 中的基因突變和變異，為**的無創(chuàng)診斷提供了有力支持。

二代測序產(chǎn)出的數(shù)據(jù)量有多少？黑龍江二代測序流程

二代測序使用的是哪種設(shè)備？吉林二代測序原理

二代測序——蛋白質(zhì)甲基化

概念及位置：蛋白質(zhì)甲基化是指在蛋白質(zhì)的氨基酸殘基上添加甲基基團。常見的甲基化修飾位點包括精氨酸（Arg）和賴氨酸（Lys）殘基。

作用

1、調(diào)節(jié)蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用：例如，組蛋白（染色體的組成成分）的甲基化可以改變?nèi)旧|(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能，影響基因的可及性。當(dāng)組蛋白 H3 的賴氨酸殘基（如 H3K4、H3K9 等）發(fā)生甲基化時，會招募不同的蛋白質(zhì)復(fù)合物，從而***或抑制基因轉(zhuǎn)錄。2、調(diào)節(jié)酶的活性：某些酶的活性可以通過蛋白質(zhì)甲基化來調(diào)節(jié)。甲基化可能改變酶的活性中心的結(jié)構(gòu)或者影響其與底物的結(jié)合能力。

檢測方法：質(zhì)譜分析：這是一種***用于檢測蛋白質(zhì)甲基化的方法。它能夠精確地確定蛋白質(zhì)分子的質(zhì)量，通過比較甲基化和未甲基化蛋白質(zhì)的質(zhì)譜圖，可以鑒定甲基化位點和修飾程度。 吉林二代測序原理

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