鹽酸克倫特羅檢測卡運(yùn)用抗原抗體的特異性反應(yīng)以及側(cè)向?qū)游龊湍z體金技術(shù)進(jìn)行樣本中克倫特羅分子的快速定性檢測。鹽酸克倫特羅檢測卡具有特異性好、靈敏度高、簡便、快速、對實(shí)驗(yàn)條件和操作者要求不高等特點(diǎn),適合用作大批量樣本的初步篩選和現(xiàn)場檢測,缺點(diǎn)是假陽性率較高。中國農(nóng)業(yè)部1997年發(fā)文禁止鹽酸克倫特羅(瘦肉精)在飼料和畜牧生產(chǎn)中使用,商務(wù)部自2009年12月9日起,禁止進(jìn)出口萊克多巴胺和鹽酸萊克多巴胺 。2001年12月27日、2002年2月9日、4月9日,農(nóng)業(yè)部分別下發(fā)文件禁止食品動物禁止使用β激動劑類藥物作為飼料添加劑(農(nóng)業(yè)部176號、193號公告、1519號條例)。 在進(jìn)行測試前先完整閱讀使用說明書,使用前將檢測卡和待檢樣本恢復(fù)至室溫。浙江孔雀石綠膠體金檢測卡
膠體金檢測卡顯色原理完整梳理膠體金檢測卡是一種快速診斷試紙,寵物醫(yī)生們都知道膠體金檢測卡有兩條顯示線T線和C線。加樣反應(yīng)一段時間,C線一定顯色(除了檢測板出現(xiàn)問題的狀況),T線顯色為陽性,不顯色為陰性。
那么C、T線是如何顯色的?檢測板的原理是什么?C線為什么會有不顯色的時候?下面小編將用通俗的言辭給你解釋關(guān)于膠體金檢測卡的原理。
膠體金檢測板是利用免疫層析法進(jìn)行定性檢測的。這就涉及了抗原抗體的特異性反應(yīng)。所謂特異性:就是某種抗體專一性的識別結(jié)合某種抗原決定簇。
C、T線上分別固定有兩種不同的抗體,分別識別不同的抗原決定簇。其中T線抗體識別待測抗原,C線抗體識別膠體金偶聯(lián)的抗體。檢測板的內(nèi)部有一個膠體金結(jié)合墊,表面分布有膠體金顆粒,膠體金可以理解為一種顯色標(biāo)記物,同時與一種抗體偶聯(lián)。C、T線顯示出的紅色就是膠體金大量聚集的結(jié)果。 浙江孔雀石綠膠體金檢測卡膠體金是一種常用的標(biāo)記技術(shù)。
膠體金標(biāo)記,實(shí)質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。吸附機(jī)理可能是膠體金顆粒表面負(fù)電荷,與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)因靜電吸附而形成牢固結(jié)合。用還原法可以方便地從氯金酸制備各種不同粒徑、也就是不同顏色的膠體金顆粒。這種球形的粒子對蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的吸附功能,可以與葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、du素、糖蛋白、酶、抗 生su、激 素、牛血清白蛋白多肽綴合物等非共價結(jié)合,因而在基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)驗(yàn)中成為非常有用的工具。
免疫金標(biāo)記技術(shù)(Immunogold labelling techique) 主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性,在金標(biāo)蛋白結(jié)合處,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒,當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時,肉眼可見紅色或粉紅色斑點(diǎn),因而用于定性或半定量的快速免疫檢測方法中,這一反應(yīng)也可以通過銀顆粒的沉積被放大,稱之為免疫金銀染色。
(1)從原包裝未開封的鋁箔袋中取出檢測卡,打開后請在在1h內(nèi)盡快地使用。(2)檢測卡應(yīng)平放。筆者在現(xiàn)場檢疫時曾遇到過這樣的情況:檢測卡不平放(地面不平,有一定的坡度)時,滴加尿樣后液面流動過快,有時出現(xiàn)質(zhì)控線和檢測線都不顯色,但平放后顯色正常。所以在實(shí)際操作時一定注意檢測卡不能傾斜,否則影響結(jié)果判定。(3)使用過程中盡量不要觸摸檢測卡**的白色面膜;避免陽光直射和風(fēng)扇直吹。(4)點(diǎn)樣前,應(yīng)待檢測卡和樣本溫度恢復(fù)至室溫即20±5℃后,方可進(jìn)行檢測。筆者在某年的冬季,檢測一批發(fā)往杭州的生豬時,在室外點(diǎn)樣后幾個檢測卡竟質(zhì)控線和與檢測線都不顯色。后來在室內(nèi)檢測時各個檢測卡都顯色,這才知道是溫度的問題。(5)過期、破損、污染或無效的檢測卡切勿使用。(6)檢測卡為一次性產(chǎn)品,請勿重復(fù)使用。(7)一定注意未使用產(chǎn)品的防潮保護(hù),確保封口的緊密度,否則會產(chǎn)生錯誤或者不確定的結(jié)果。(8)產(chǎn)品應(yīng)儲存于陰涼避光干燥處,4~30℃密封。忌冷凍。使用過程中請注意檢測卡有效期。該產(chǎn)品有效期為12個月。膠體金檢測卡需要采集樣品,采集樣品時需要注意樣品的存放。
鹽酸克倫特羅(瘦肉精)屬于β-開心劑,近年來被非法添加到飼料中以提高脂肪型動物的瘦肉率和加速動物生長,因其添加劑量是防治劑量的5-10倍,鹽酸克倫特羅檢測試劑盒檢測速度快,檢測一個樣品只需5分鐘;并且條帶清晰,準(zhǔn)確度高,解決了常規(guī)檢測方法中由于雜質(zhì)干擾嚴(yán)重而造成的條帶不清,易出現(xiàn)假陰性或假陽性的問題。瘦肉精快速檢測卡是一種檢測鹽酸克倫特羅(俗稱:瘦肉精)的快速篩選方法,適用于豬肉肝臟、肺臟、腎臟、瘦肉樣品的檢測。 樣本滲出液的檢出限為3ng/ml??梢酝ㄟ^看豬肉的顏色判斷。喂過"瘦肉精"的豬瘦肉外觀特別鮮紅,纖維比較疏松;切成二三指寬的豬肉比較軟,不能立于案板上;瘦肉與脂肪間有黃色液體流出,脂肪特別薄;一般健康的瘦豬肉是淡紅色,肉質(zhì)彈性好,瘦肉與脂肪間沒有任何液體流出。本文研究建立一種檢測新型瘦肉精多殘留膠體金檢測卡的方法,能對大量樣品進(jìn)行定量檢測。浙江孔雀石綠膠體金檢測卡
膠體金檢測卡是一種快速診斷試紙條。浙江孔雀石綠膠體金檢測卡
鹽酸克倫特羅檢測卡運(yùn)用抗原抗體的特異性反應(yīng)以及側(cè)向?qū)游龊湍z體金技術(shù)進(jìn)行樣本中克倫特羅分子的快速定性檢測。用的克倫特羅分子與膠體金顆粒結(jié)合后,包被在醋酸纖維素膜上;在硝酸纖維素膜上將克倫特羅抗原和羊抗鼠二抗分別包被在檢測區(qū)(T)和質(zhì)控區(qū)(C)。當(dāng)尿樣或組織樣本加樣后,樣本中的克倫特羅分子與克倫特羅-BSA-膠體金偶聯(lián)物一起層析泳動到檢測區(qū)競爭與克倫特羅抗體結(jié)合,剩余的克倫特羅-BSA-膠體金繼續(xù)泳動到質(zhì)控區(qū)與抗體結(jié)合。因此,當(dāng)樣本中的克倫特羅濃度超過一定量后,膠體金偶聯(lián)物就不能與克倫特羅抗體結(jié)合,此時檢測區(qū)不出現(xiàn)紫紅色線條;當(dāng)樣本中克倫特羅濃度低于一定值或樣本中沒有克倫特羅時,膠體金偶聯(lián)物就與克倫特羅抗體結(jié)合,從而在檢測區(qū)顯示出一條紫紅色線條;而無論樣本中是否含有克倫特羅分子,質(zhì)控區(qū)都會出現(xiàn)紫紅色線條,以示檢測有效。浙江孔雀石綠膠體金檢測卡